腎透明細(xì)胞癌是常見(jiàn)的具有侵襲的腎細(xì)胞癌，由于缺乏早期早期診斷標(biāo)志物和抗放療和化療，患者五年生存率低，因此尋找有效的臨床生物標(biāo)志物和靶點(diǎn)以提高KIRC患者的生存率是十分必要的。KLF2，一種轉(zhuǎn)錄因子，在多種癌癥中的作用已有報(bào)道。本課題結(jié)合生物信息學(xué)和TCGA等數(shù)據(jù)庫(kù)分析KLF家族在腎透明細(xì)胞癌中的作用，并通過(guò)細(xì)胞水平驗(yàn)證。
實(shí)驗(yàn)技術(shù)：
1.利用慢病毒體系構(gòu)建KLF2過(guò)表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系
2.通過(guò)細(xì)胞劃痕、western bloting、Tranwell、cck8等實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證KLF2對(duì)腎透明癌細(xì)胞系惡心生物學(xué)行為的影響

1、學(xué)習(xí)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、蛋白印跡、慢病毒轉(zhuǎn)染等實(shí)驗(yàn)，了解公共生物信息學(xué)分析平臺(tái)。
2、第一作者文章在投：Analysis on the expression levels and prognostic values of Krppel-like factors in Kidney Renal Clear Cell Carcinoma.

寄生蟲(chóng)和宿主的長(zhǎng)期共生共存，生存競(jìng)爭(zhēng)使其相互作用界面的分子多樣性十分豐富，Ascaris類型分泌多肽是其中一種。我們知道，秀麗隱桿線蟲(chóng)是一種模式生物，遺傳背景和基因序列清楚，可以用來(lái)對(duì)比以篩選其他三種寄生線蟲(chóng)可能具有抗補(bǔ)體活性的基因序列。據(jù)此，本項(xiàng)目擬選擇非寄生的秀麗隱桿線蟲(chóng)（Caenorhabditis elegans，C. elegans）作為對(duì)照線蟲(chóng)，篩選鑒定寄生線蟲(chóng)（蛔蟲(chóng)、錫蘭鉤和曼氏血吸蟲(chóng)）中調(diào)控補(bǔ)體分子網(wǎng)絡(luò)的Ascaris類型多肽.在此基礎(chǔ)上，研究新型Ascaris類型多肽抗補(bǔ)體的作用靶點(diǎn)和分子機(jī)制，為天然補(bǔ)體抑制劑先導(dǎo)藥物的研發(fā)提供新思路。
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：
.蛋白表達(dá)：通過(guò)分子克隆技術(shù)構(gòu)建重組載體，將構(gòu)建成功的重組載體進(jìn)行蛋白表達(dá)，結(jié)合ESI質(zhì)譜結(jié)果顯示重組表達(dá)產(chǎn)物的正確性。
2.功能鑒定：建立體外補(bǔ)體經(jīng)典激活途徑體系，開(kāi)展重組蛋白抗補(bǔ)體活性實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，鑒定候補(bǔ)肽的抗補(bǔ)體功能。

1、掌握分子克隆、蛋白純化等實(shí)驗(yàn)，為本課題后續(xù)發(fā)展提供方法
2、湖北省第五屆大學(xué)生生物實(shí)驗(yàn)技能競(jìng)賽三等獎(jiǎng)